等度高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
根據(jù)分析要求選擇適當(dāng)?shù)臉悠啡軇?，并將樣品溶解或懸浮在溶劑中?/div>
2、色譜柱準(zhǔn)備：
檢查色譜柱的狀態(tài)，確保柱子沒有損壞或堵塞。
根據(jù)分析要求選擇適當(dāng)?shù)纳V柱，并根據(jù)柱子的要求進(jìn)行條件平衡。
3、儀器準(zhǔn)備：
打開UHPLC儀器并啟動(dòng)相關(guān)軟件。
檢查儀器的狀態(tài)，如液相泵、進(jìn)樣器、檢測器和溫控系統(tǒng)等，確保其正常工作。
設(shè)置分析方法，包括流速、梯度程序、檢測器波長和積分時(shí)間等參數(shù)。
4、進(jìn)樣：
使用自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣器將準(zhǔn)備好的樣品注入到進(jìn)樣口。
設(shè)置進(jìn)樣器的參數(shù)，如進(jìn)樣體積、進(jìn)樣模式和進(jìn)樣速度等。
5、運(yùn)行分析：
開始運(yùn)行UHPLC儀器，啟動(dòng)分析方法。
監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)，確保流速和溫度等參數(shù)穩(wěn)定。
觀察檢測器輸出的信號，記錄數(shù)據(jù)或進(jìn)行實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)分析。
6、數(shù)據(jù)處理：
使用相關(guān)的軟件對得到的色譜圖進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和解析。
根據(jù)分析要求進(jìn)行峰識別、峰面積測定和定量分析。
記錄和保存分析結(jié)果，并進(jìn)行數(shù)據(jù)報(bào)告和解釋。
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